蛔虫病是人体常见的肠道寄生虫病之一。在中国,这是一个严重的公共卫生问题。严重危害人民健康,阻碍经济发展和社会进步。土壤被蛔虫卵污染是人类感染的主要来源,卫生部于 2011 年下发了《2011年全国农村环境卫生监测项目技术方案》。
要求对土壤中蛔虫卵进行检测。锦州市选取凌海市为监测点,从 2011 年开始,每年随机抽取20 个行政村进行采样,3 年共采集了 60 份样品。为配合监测工作的开展,科学有效的检测出蛔虫卵,本文通过对 60 份样品的检测结果进行分析,来探讨影响检测结果的相关因素。
1 材料与方法
1. 1 仪器
CX31 型显微镜,ALLegra X -12 型离心机,XH - C 型漩涡混匀器。
1. 2 试剂
5% 氢氧化钠溶液,饱和硝酸钠溶液。
1. 3 检测方法
1. 3. 1 检测标准 采用饱和硝酸盐漂浮法进行检测,参考《粪便无害化卫生标准》( GB7959 -1987),《土源性线虫病防治技术方案》( 2010 年版)。
1. 3. 2 检测步骤 剔除菜叶、树皮等大杂物,压碎土样中的大颗粒; 然后用孔径 3 mm 的铜筛和孔径为2 mm的铜筛过筛,收集过筛后的土样。取 50 ml 大离心管,放入过筛后的土样 10 g,加5%氢氧化钠溶液至40 ml 或 45 ml 刻度线。放入 10 颗钢珠,用橡皮塞紧塞管口,在振荡器上振荡 15 min,可反复 3 次 ~4 次,待充分混合后,以 2000 r/min,离心 4 min。弃去上部的氢氧化钠,加入饱和硝酸钠溶液充分搅拌混匀,2000 r / min 离心 4 min,再加饱和硝酸钠溶液满至管口,覆上 18 mm ×18 mm 盖玻片。静置 15 min 后,将盖玻片迅速翻转取下,置于载玻片上镜检,同时再覆上第 2 张盖玻片,如此反复,共计数 3 张盖玻片。
1. 4 质量控制
1. 4. 1 采样方法 统一 采用 1 m2范围内 5 点取样法,采集表层土壤,深度均在 5 cm ~20 cm 之间,采样量 >50 g.
1. 4. 2 清洗铜筛 每次将筛过土壤的铜筛进行清洗,晾干后筛下 1 份样品。
1. 5 统计分析
采用 SPSS 15. 0 统计软件进行数据分析。
2 结 果
2. 4 镜检对检测结果的影响
镜下计数时要求检测人员掌握活卵和死卵之间的形态区别,应将含有幼虫的计为活卵,其他阶段的或单细胞的计为死卵。
3 讨 论
根据锦州市3年来采集的60个土样中蛔虫卵的检测结果,可以看出,在统一采样方法和检测方法、保证质量控制的前提下,采样季节对蛔虫卵的检测有影响。随着土壤温度的降低,土壤中的蛔虫卵大部分死亡。为获得较高的蛔虫卵存活率,检测采样时间为7~8月,与《辽宁省农村环境卫生监测项目技术方案》要求一致。振荡器的使用应根据实验室条件确定。测试前可以比较振荡器的振荡效果。从理想振荡工具的选择上,建议实验室更换振荡效果好的振荡器。检测率受操作方法、土壤性质、离心时间和次数的影响。
实验人员只有熟悉掌握检测原理和各种影响因素,进而采用科学的检测方法,才能获得理想的检测效果进而提高土壤中蛔虫卵的检出率。
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